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高效液相色谱法在监测发酵过程中糖类变化的应用
发布时间:2025-05-15]  阅读次数:1587次

 

 

1.背景介绍

糖类定量分析在多个领域中具有重要意义。其中在食品及生物燃料的生产过程中,糖类通过微生物发酵过程生产乙醇。出于工艺设计和质量控制的目的,建立合适的检测方法以准确进行糖类的定量分析和监测至关重要。利用高效液相色谱可仅以水作为流动相,大幅简化了糖类的分析流程,操作简便且分离效果优异。

 

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2.方法优势

可同时分离低聚糖、单糖及三糖以下的糖醇

流动相仅为水,无需复杂准备

精准监测生物发酵过程中糖类的变化

 

3.应用

前处理

样品:取适量样品,纯水稀释定容后上机。

对照品:取适量标准品(共20种)储备液用于确认保留时间,并将其中葡萄糖、果糖、蔗糖和乙醇配置成一定范围区间的标准曲线溶液。

 

色谱分析条件

色 谱 柱 :Shim-pack SUR-Na250mm×7.8mm I.D.8μm

保 护 柱 :Shim-pack SUR-Na(G)50mm×7.8mm I.D.8μm

流 动 相 :水

流 速 : 0.6mL/min(单色谱柱);0.5mL/min(双色谱柱串联)

柱 温 : 80℃

进 样 体 积:2µL

洗 脱 方 式:等度洗脱

 

实验结果

①  对照品色谱图:将20种标准溶液分为五组,分别测定其保留时间。

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1.棉子糖;2麦芽三糖;3蔗糖;4麦芽糖;5乳糖;6葡萄糖;7甘露醇;8鼠李糖;9山梨糖醇;10半乳糖;11甘露糖;12果糖;13木糖;14木糖醇;15肌醇;16岩藻糖;17阿拉伯糖;18甘油;19核糖;20乙醇)

20种标准溶液色谱图

 

校准曲线:分别制作蔗糖、葡萄糖、果糖和乙醇的校准曲线,在一定浓度范围内其相关系数R2均大于0.99999,线性良好。

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果糖、蔗糖、葡萄糖、乙醇校准曲线

 

 ③ 实际样品分析结果及变化曲线:对糖蜜中的酵母发酵液进行分析。同时在发酵过程中4个不同的时间点分别取样分析。结果表明,在发酵过程中,蔗糖首先分解为果糖和葡萄糖,此后随着发酵过程的推移,逐步生成乙醇且浓度持续上升。

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酵母发酵液色谱图

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发酵液中各种物质的变化曲线

 

4.结论

采用岛津Nexera lite系统可对发酵过程中的糖类变化进行有效监测,对多种糖类的分析线性良好,同时分析方法操作简单,可广泛应用于食品和生物燃料等行业。

 

本文内容非商业广告,仅供专业人士参考。

 



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