2020年12月，欧盟发布COMMISSION REGULATION (EU) 2020/2040，修订条例 (EC) No. 1881/2006 关于某些食品中吡咯里西啶类生物碱（Pyrrolizidine Alkaloids，以下简称PAs）的最高含量，正式设定PAs在食品中的限量要求。其中对于茶叶和调味茶中的限量为150μg/kg，该限量要求计算21种吡咯里西啶类生物碱的总和。该法规将于2022年7月1日正式执行。

PAs是植物产生的用于抵御食草动物的一类毒素，分布广泛。大多具有肝毒性和潜在致癌性，可以在蜂蜜、茶和草药中找到。每种PA的毒性各不相同，对于食品制造商和食品药品监管机构而言，准确识别和量化食品中的PAs至关重要。

迄今为止，已知的PA超过660种，其中许多是异构体。对于异构体PA的鉴定，与LC-MS/MS相比，SFC-MS/MS提供了更加优异的色谱选择性。本文介绍利用SFC-MS/MS分析34种吡咯里西啶类生物碱（包括5种石松胺和2种千里光宁碱异构体）的应用案例，轻松应对欧盟茶叶检测新规。

样品前处理：茶样品用 0.05 M 硫酸超声提取两次，合并提取物并用氢氧化铵调节pH值，然后进行固相萃取（具体步骤参见原文），洗脱物氮吹干燥后用1mL甲醇复溶，离心10min后取上清液待测。

色谱及质谱条件：参见原文。

SFC-MS/MS分析34种吡咯里西啶类生物碱的典型色谱图

5种石松胺和2种千里光宁碱异构体基线分离色谱图

利用岛津SFC方法开发系统，分别考察了4种不同的手性色谱柱和8种不同的改性剂组成的色谱条件。得到的最终分析条件，可以对18种PA和16种相关N-氧化物进行定量分析。对红茶基质样品的分析结果表明从2到200μg/kg 范围内线性良好，部分PA定量下限可达到0.1μg/kg。具体数据参见下表。

红茶基质中34种吡咯里西啶类生物碱的 LLOQ

基于本方法分析了10种市售茶叶样品，其中4种可以检出1种或多种吡咯里西啶生物碱。1个茶叶样品中检出了欧天芥菜碱、天芥菜碱、毛果天芥菜碱及其相关N-氧化物，3个茶叶样品中检出了石松胺、刺凌德草碱及其相关N-氧化物。

本应用中使用的仪器（Nexera SFC+LCMS-8060）

参考文献：

1，Determination of pyrrolizidine alkaloids in plant material using SFC-MS/MS, ASMS 2019, TP-221