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学习MALDI原理,了解MALDI应用,精彩尽在技术培训交流会
发布时间:2018-12-03]  阅读次数:693次

来源:分析测试百科网

  分析测试百科网讯 2018年11月30日,由北京科学仪器装备协作服务中心、首都科技条件平台检测与认证领域中心主办,首都科技条件平台北京大学研发实验服务基地承办,首都科技条件平台生物医药领域中心、北京科方创业科技企业孵化器有限公司协办的“MALDI-TOF MS 技术培训交流会”在华腾科技大厦隆重举行,来自高校、科研院所、医院、第三方医学检测等单位近百位专业人士参加了本次会议。分析测试百科网作为支持媒体全程跟踪报道了本次会议。

  MALDI-TOF-MS又称为生物质谱,因其可分析生物大分子而在 2002 年获得诺贝尔化学奖。近年来, MALDI-TOF-MS在我国得到了广泛使用,并且在微生物鉴定、核酸分析以及质谱成像等领域取得了突破性进展,同时涌现了多家研发生产企业。与此同时,随着科学技术的发展,人们对生活质量的要求越来越高,高端科研分析技术的应用日趋广泛,众多高校、科研院所及企业对高端仪器设备科研技术的需求愈发强烈。在此情况下,为进一步提高高校优质仪器设备资源的利用率,帮助中小企业开展科研人才队伍建设、提升科研人才的大型贵重仪器知识水平和应用技能,北京科学仪器装备协作服务中心特举办了本次会议,邀请了多位MALDI-TOF-MS领域知名学者分别从不同的角度讲解了MALDI-TOF-MS的理论基础、仪器结构以及应用发展,并现场为参会人员答疑解惑。

培训会现场

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北京科学仪器装备协作服务中心协作共用技术部主管 苏立清

  北京科学仪器装备协作服务中心协作共用技术部主管苏立清主持本次培训会。苏立清表示,虽然中国质谱大会刚刚结束,但质谱界的大咖仍然来到这里,为在座学员带来质谱方面的讲解。希望参会学员能够从大咖的报告中获得所需要的知识,提高自身水平,为提升中国科研水平贡献出自己的力量。随后,苏立清介绍了首都科技条件平台情况。首都科技条件平台是国家科技基础条件平台指导下的北京地方科技条件平台,建设包括研发实验服务基地、领域中心和区工作站的服务体系,跨部门、跨领域整合仪器设备、科技成果和科技人才三类科技资源,提供测试检测、联合研发及技术转移等服务。希望通过首都科技条件平台的优质资源提升北京地区质谱领域实验人员的专业技术水平,共同推动科研发展。

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军事医学研究院 杨松成研究员

  本次培训首先由军事医学研究院杨松成研究员带来“MALDI-TOF-MS的基本原理及其在生物医药中的一些应用”报告。杨松成表示,质谱自发明以来已经先后获得6次诺贝尔奖,并且在此期间发挥了重大作用。随后,杨松成介绍了质谱在生物医学领域的应用情况。据介绍,MALDI-TOF-MS在这个领域主要进行细菌、代谢组学、寄生虫以及食品分析,并且通过MALDI可以观看、分析生物组织中的分子状态。与传统分析方法对比,MALDI-TOF-MS方法具有快速、可靠以及搞重复率的优点。因此MALDI可以作为细菌等微生物鉴定的有力工具。同时,杨松成表示,除了检测病变情况外,质谱成像也可以监测药物在人体中的分布情况,其拥有不需要同位素标记,无需靶向药物,可同时观察药物分子和生物反应状态并实现原位内源代谢物变化成像的优点。

  在代谢组学应用方面,MALDI主要用于分析细胞中700Da以下物质,在采用碳、金属、金属有机物框架材料等基质材料后,大幅降低了背景值,并且使用这些基质具有重复性好,消除基质与吸附质之影响的优点,大幅提高了检测精度和灵敏度。

  对于鉴定寄生虫方面,MALDI革新了细菌与真菌界的鉴定方法,但较为可惜的是这种方法还未用于肠道菌鉴定。在实际使用方面,例如鉴定阿米吧原虫,传统方法费时费力,采用MALDI后可以快速、准确的鉴定,并且有望发展成临床生物鉴定方法。

  最后,杨松成研究员介绍了MALDI技术用于食品鉴定。例如,MALDI可以鉴定哺乳动物、人类以及配方奶中的蛋白质。使用这种技术可以快速、高准确、高重复的鉴定不同奶源类型以及蛋白质种类,并且可以用于牛奶掺加、种类和品牌鉴定。

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首都医科大学附属北京同仁医院 黄燕飞

  首都医科大学附属北京同仁医院黄燕飞带来题目为“MALDI-TOF-MS在临床微生物学鉴定中的应用”的报告。黄燕飞介绍到,微生物鉴定有很多方法,传统方法存和分子技术存在一定问题,例如相近菌株难分辨、对人员要求高、操作复杂等,因此其限制了后续鉴定效果并且影响后续临床用药。使用MALDI存在操作简便,高通量,鉴定&同源分析同步进行等有点。经过医院实际使用MALDI在细菌鉴定、耐药性分析和同源性鉴定,这项技术可以很好的鉴别缓症链球菌和肺炎链球菌、生长不良的颗粒链球、产气荚膜芽孢梭菌、奴卡菌鉴定以及葛式放线菌等。除了细菌鉴定外,MALDI也可用于药物敏感性实验鉴定,例如碳青霉烯酶的耐药性检测或者不动杆菌同源性分析。

  除了上述工作以外,MALDI也可以用于无菌体液直接鉴定以及丝状真菌鉴定和分枝杆菌鉴定。同时,黄燕飞也表示,除了微生物学以外,质谱也广泛用于宏基因组学、代谢组学和培养组学分析。在使用中需要注意仪器的安装、维护、保养等,同时也需要注意流动相配置,样品、标准品质量控制,采用标准化流程等问题。

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融智生物科技(青岛)有限公司董事长 周晓光

  融智生物科技(青岛)有限公司董事长周晓光带来题目为“迭代MALDI-TOF与质谱分子成像技术”的报告。周晓光介绍到,MALDI-TOF起源于上世纪80年代,第一款商业产品由AB公司实现并且用于蛋白质多肽分析。随后MALDI技术用于微生物、核算基因分型鉴定。随后周晓光介绍到,质谱技术由离子化与离子分离两种技术,根据不同物质,可以选择不同离子源和不同的离子分离方式。MALDI-TOF属于结合质谱分子检测特异性和组织样本空间信息结合体,其空间分辨率由激光轮廓滤波、激光入射角激光斑点聚焦、机械移动精度等参数决定,样品扫描速度也决定了样品成像质量。在传统技术需要5天才能完成成像的情况下MALDI成像只需6小时。虽然MALDI有多项优势,但也存在边缘远电场效应造成的整靶板电厂非均一性、成像速度、空间分辨率以及灵敏度等问题。随后,周晓光介绍了使用融智生物改进的MALDI-TOF设备进行的胰腺脂质小分子成像、蛋白分子成像、药物代谢分子成像、胰岛单细胞成像的实际分析实例。

  最后,周晓光介绍了质谱联用技术。周晓光表示,目前质谱成像技术已经同其他显微技术相结合,例如形成多模态质谱显微图像融合。除了与显微技术融合,也可以与MRI技术等结合,达到更清晰的成像。

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北京博淼生物科技有限公司 梁海泳

  北京博淼生物科技有限公司梁海泳带来题目为“MALDI-TOF MS 基因检测”的报告。梁海泳表示MALDI可用于SNP分型检测和DNA甲基化定量检测。在SNP检测中,TO通过SNP位点两个等位基因之间的质量差异进行分析。其优势在于检测准确性高,通量高,一个反应可检测30个位点,检测时间短等优势。在DNA甲基化定量检测方面,MALDI-TOF的优势在于准确性高,检测片段覆盖较长,可达400-600bp,成本低。除此以外,也可以用于临床方面检测,例如耳聋基因检测,HPV基因检测,个体化用药基因检测以及疾病预警基因检测。


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