来源：分析测试百科网

紫外分光光度法测定苯甲酸

一 实验目的

1.       掌握吸收曲线的测定与绘制方法

2.       学习运用直接比较法求样品含量

3.       掌握752型分光光度计的使用方法

二 基本原理

样品中的苯甲酸在碱性条件下形成苯甲酸盐。苯甲酸及其盐对紫外光有选择性吸收，其吸收光谱的最大吸收波长在225nm左右。

用752型分光光度计可测定物质在紫外光区、可见光区的吸收光谱，并可定量测定物质含量。

三 仪器与试剂

（一）   仪器

752型分光光度计，25px石英吸收池一套，50ml容量瓶二只，刻度吸管5ml、10ml各一支，滴管一支

（二）   试剂

0.01mol/L NaOH溶液；

苯甲酸标准贮备液：精确称取分析纯苯甲酸100mg（预先经105℃烘干），用0.1mol/LNaOH溶液100ml溶解后，再用蒸馏水稀释至1000ml。此液1ml相当于0.1mg苯甲酸。

苯甲酸标准溶液：取苯甲酸贮备液4.00ml，置于50ml容量瓶中，用0.01mol/LNaOH溶液定容，摇匀。此液1ml相当于8μg苯甲酸。

四 操作步骤

1.       苯甲酸吸收曲线的绘制

测定条件：氘灯，25px石英比色皿，苯甲酸标准溶液，0.01mol/LNaOH为参比液

测定波长（nm）：从210nm~240nm每隔一定波长（2nm~5nm）测定一次吸光度，在225nm左右隔1nm测定一次吸光度。用以上波长为横坐标，测得的吸光度为纵坐标绘制苯甲酸的紫外吸收曲线。

2.       直接比较法测定样品溶液中苯甲酸的含量

取10.00ml样品溶液，置于50ml容量瓶中，用0.01mol/LNaOH溶液定容，摇匀后备用。

   在上述吸收曲线中找出最大吸收波长，用此波长作为定量分析的测定波长。以0.01mol/LNaOH溶液为参比液，在完全相同的条件下测定苯甲酸标准溶液和稀释后样品溶液的吸光度。

五 数据处理 按下式计算样品溶液中苯甲酸的浓度：

式中C_x是待测样品液的浓度；C_s是苯甲酸标准液的浓度；A_x是待测样品液的吸光度；A_s是苯甲酸标准液的吸光度。

六 注意事项

1.       在测定时应将光闸拉出，不测定时立即将光闸推入，以保护光电管。

2.       当外界电压波动较大时要用电子交流稳压器，且随时观察并校正暗电流。