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紫外分光光度法测定磺基水杨酸

一、目的要求

1、掌握紫外分光光度法的测定原理；

2、熟悉紫外分光光度计的结构流程；

3、熟练掌握紫外分光光度计的使用。

二、实验原理

磺基水杨酸在紫外区有吸收,在最大吸收波长处其吸光度与磺基水杨酸的浓度成正比。

据此可测定样品中的磺基水杨酸的浓度.

定量方法:

1 比较法:As/Ax=Cs/Cx

2.标准曲线法

三、仪器与试剂

紫外可见分光光度计、200mg/mL 磺基水杨酸

四、参考步骤

1、比较法：

取标准溶液10mL 于50mL 容量瓶中，稀释至刻度,摇匀。

吸收曲线的绘制：以水为参比，用25px 比色皿，在220-400nm，每隔5-10nm 测定吸光

度，绘制吸光度—波长曲线，选择测量波长(λmax)。

取10mL 样品于50mL 容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。

以水为参比，用25px 比色皿，在λmax 测定样品吸光度。

根据比较法计算样品中磺基水杨酸的浓度。

2、标准曲线法：

(1) 取标准溶液10mL 于50mL 容量瓶中,稀释至刻度,摇匀。

(2)吸收曲线的绘制:以水为参比,用25px 比色皿,在220-400nm,每隔5-10nm 测定吸光度,绘制

吸光度—波长曲线,选择测量波长(λmax)。

(3)分别取2.0, 4.0, 6.0, 8.0, 10.0mL 标准溶液于5 个50mL 容量瓶中,稀释至刻度,摇匀。

(4)标准曲线的绘制: 以水为参比,用25px 比色皿,在λmax 初分别测定上述5 种吸光度.绘制吸

光度—浓度标准曲线(或用回归分析法进行线性拟合,得出回归方程)。

(5) 取一定体积样品于50mL 容量瓶中,稀释至刻度,摇匀. 以水为参比,用25px 比色皿,在λ

max 测定样品吸光度.根据标准曲线或回归方程求出样品中磺基水杨酸的浓度。