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紫外分光光度法绘制苯酚标准曲线的方法
发布时间:2018-10-09]  阅读次数:618次

来源:分析测试百科网

一、实验目的
1、掌握紫外光谱法进行物质定性、定量分析的基本原理;
2、学习紫外可见分光光度计的使用方法。
二、实验原理
含有苯环和共轭双键的有机化合物在紫外区有特征吸收。物质结构不同对紫外及可见光的吸
收具有选择性。其中,最大吸收波长λ、摩尔吸收系数ε及吸收曲线的形状不同是进行物质
定性分析的依据。
由于在λmax 处吸光度A 有最大值,在此波长下A 随浓度的变化最为明显,方法的灵敏度
最大,故在紫外分光光度计上作苯酚水溶液(试液)的吸收光谱曲线,再由曲线上找出λ
max,据此对物质进行定量分析。 用紫外分光光度计进行定量分析时,若被分析物质浓度太
低或太高,可使透光率的读数扩展10 倍或缩小10 倍,有利于低浓度或高浓度的分析,其方
法原理是依据朗伯-比耳定律:A=εbc。
三、主要仪器与试剂
主要仪器:美析紫外可见分光光度计UV-1300;UV-1500;1cm 石英吸收池2 个;50mL 比色
管5 支;5mL、1 支;吸耳球1 个。 试剂:苯酚标准溶液:100mg/L;
四、实验步骤
(1)、分析溶液的配制
取5 支50mL 的比色管,用移液管分别准确加入0.5mL、1mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL 浓度为
100mg/L 的苯酚标准溶液,用去离子水稀释至25mL 刻度,摇匀。实验数据记录于标准表中。
(2)、确定最大吸收波长
取稀释后浓度为8 mg/L 的苯酚标准溶液,在紫外-可见分光光度计上,用1cm 石英吸收池,
去离子水作参比溶液,在200~330nm 波长范围内进行扫描,绘制苯酚的吸收曲线。在曲线
上找出λmax1、λmax2。
(3)、标准曲线的制作
各浓度的苯酚标准溶液,用1cm 石英吸收池,去离子水作参比溶液,在选定的最大波长下,
按顺序从低至高浓度依次测量各溶液的吸光度,实验数据记录于标准表中。以吸光度对浓度
作图,作出标准工作曲线。
五、数据记录及结果分析 标准曲线图


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