来源：分析测试百科网

分光光度计是生物学实验室不可或缺的好伙伴。它常用来测定生物样品中的核酸、蛋白和细胞。这些样品要么体积有限，要么浓度很高，为分光光度法测定带来了一定挑战。当然，技术在不断发展，让微量样品的测定成为现实。在分光光度计的使用过程中，有哪些需要注意的呢？让专家来告诉你。

据介绍，分光光度计使用过程中的zui大问题往往在于用户选择了错误的方法或错误的比色皿。而另一个问题在于纯化的策略不对。用户应正确选择分光光度计，并注意下面的一些问题。

低体积 vs. 低浓度

我们首先要了解样品的特性。有时，我们可能会混淆低体积和低浓度，产生有问题的数据。这时，我们有必要回忆一下比尔-朗伯定律：当一束平行单色光垂直通过某一均匀非散射的吸光物质时，其吸光度A与吸光物质的浓度c及吸收介质的厚度l成正比。根据这一定律，当吸收介质厚度不变时，A与c之间应该成正比。而对于高浓度的样品，应使用较短的光程长度进行测定。

样品纯度

样品纯度很重要，这不仅仅关乎分光光度法测定，也涉及到其他的下游应用。样品中的杂质可能包括蛋白、缓冲液组分，甚至细胞。你应当根据样品量和浓度来选择样品制备策略。各大厂家都提供选择指南和操作手册，教你如何选择zui适合的产品。此外，要避免过滤柱的过载，以免产生不纯的样品洗脱液。

选择适当的比色皿

比色皿是光学透明的容器，装有分析溶液，将样品引入光路中。分析波长在350 nm以上时，可选用玻璃或石英比色皿，在350 nm以下时须使用石英比色皿，当然，现在也有一次性的塑料比色皿。有些比色皿提供不同的光程长度，如Eppendorf的UVettes。它提供两种不同的透光光径：10 mm和2 mm。通常浓度的样品可以用10 mm光程长度进行检测。对于高浓度的样品，只需将比色皿旋转90°，使用稍短的2 mm光径进行检测。

在使用前一定要仔细检查比色皿，如果有刮花或油污，或者上面有指纹，都会导致不准确的测定结果。目前市场上的有些分光光度计很灵活，可以容纳多种比色皿，包括微量比色皿。这些微量比色皿使用微量的高浓度样品，特别适合生物分子（如核酸和蛋白）的测定。有些分光光度计是直接把样品放在测量窗口上，也十分方便。

软件要求

没人想把时间花在仪器培训上。因此，在您选择分光光度计时，简单易用也是个重要的考量因素。即拆即用，这当然是zui美了。数据管理和存储也应当考虑。在有些情况下，电源中断或系统故障会导致数据损失。如今有些仪器能直接连到电脑，而不需要额外的软件或存储设备。

随着技术的发展，专为生物学应用而开发的分光光度计在不断涌现。相信我们的选择会越来越多，而仪器使用也会越来越简单、方便、灵活。