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茶叶中多酚类物质占茶叶干重的18%～36%,主要包括黄烷醇类、黄酮和黄酮苷类、花青素和花白素以及酚酸和缩酚酸。儿茶素属黄烷醇类,其含量占茶鲜叶干重的12%～24%,占多酚总量的70%～80%。茶黄素是红茶中的主要成分,在红茶加工过程中主要由儿茶素配对氧化而成,含量占红茶干重的1%～5%。儿茶素和茶黄素不仅是茶叶滋味的主要成分,而且还是饮茶有益健康的重要活性成分,它们具有明显的抗氧化、清除自由基、抗血脂、抑菌杀菌、抗过敏、防止动脉粥样化、抗辐射等作用。随着当前儿茶素和茶黄素生物活性和药理功能研究的不断深入,儿茶素和茶黄素单体分离纯化的研究显得越发突出,因此寻找一种简单易行、高效低成本的方法来制备儿茶素和茶黄素单体具有重要的现实意义。

本文在查阅国内外大量文献的基础上,探索并成功创立了以中压制备液相色谱(MPLC)来分离制备儿茶素单体以及茶黄素单体的方法。

论文具体的研究内容和取得的结果如下： 1.通过查阅大量文献,对目前国内外已有的分离制备儿茶素和茶黄素的方法展开了综述。分析比较了硅胶柱色谱法、凝胶柱色谱法、吸附树脂法、高效制备液相色谱法以及高速逆流色谱法在儿茶素及茶黄素分离纯化中应用的优缺点。MPLC介于高效制备液相色谱和常压柱色谱之间的一种较新的制备液相色谱,它具有上样量较大、分离快速高效、成本低廉的优势,适用于单体的小规模快速分离制备。 2.以自制茶多酚(多酚含量92.6%)为原料,以反相C18为填料,使用MPLC方法对儿茶素进行分离纯化研究,用95min得到四种主要儿茶素单体,纯度分别为：表没食子儿茶素(EGC)：91.8%；表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG):97.6%:表儿茶素(EC)：97.7%；表儿茶素没食子酸酯(ECG)：99.3%。四种主要儿茶素纯品得率56.0%,总回收率达到68.2%。 3.以自制茶色素(茶黄素含量65.2%)为原料,以反相C18为填料,使用MPLC方法对茶黄素进行分离纯化,用190min一步分离得到茶黄素(TF1)、茶黄素单没食子酸酯[TF2a,2b,为茶黄素-3-单没食子酸酯(TF2a)和茶黄素-3'-单没食子酸酯(TF2b)的混合物]、茶黄素双没食子酸酯(TF3)三种茶黄素纯品,纯度分别为TF1:92.6%； TF2a.2b:98.9%；TF3:98.7%、三种茶黄素纯品得率51.5%,总回收率达79.0%。 4.为了使TF2a和TF2b完全得以分离,以获得TFI、TF2a、TF2b、TF3四种主要茶黄素单体。通过进一步条件优化,以茶色素为原料,用MPLC方法经550min分离后,一次性成功得到TF1、TF2a、TF2b、TF3四种主要茶黄素单体,纯度分别为TF1:92.6%；TF2a:96.5%；TF2b:94.8%；TF3:98.7%。四种茶黄素单体得率为53.5%,总回收率达82.1%。 5.论文对分离制备得到的儿茶素单体进行了波长扫描、1H-NMR和13C-NMR检测分析以及质谱分析,对茶黄素单体进行了波长扫描、1H-NMR和13C-NMR检测分析,确证所得产品为相应单体。