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胡萝卜素、叶黄素和叶绿素在反相超临界色谱中分离初探
发布时间:2018-09-20]  阅读次数:744次

来源:分析测试百科网

摘 要:在本项研究中,应用反相C18固定相超临界CO2色谱对胡萝卜素、叶黄素和叶绿素的分离进行了初步的探索。胡萝卜素、叶黄素和叶绿素的下述色谱条件下被完全分开:色谱柱:Zorbax ODS;流动相:3%(V/V)正丙醇及超临界CO2 流体;超临界条件:压力:4000psi;温度:40℃;流速:2.0ml/min;检测波长:435nm。与反相C18高压液相色谱结果相比,这些组分的超临界色谱呈正相洗脱行为。这一结果表明:超临界CO2流体具有很强的非极性,同时,也证明了预装的反相C18柱可以作为正相固定相来分离这些化合物.
关键词:胡萝卜素;叶黄素;叶绿素;超临界流体色谱

    在完整的生物合成系统中,不含氧的类胡萝卜素-胡萝卜素(Carotene)- 和含氧的类胡萝卜素- 叶黄素(Xanthophyll)- 通常是共存的。在光合组织中,类胡萝卜素(Carotenoid)又总是与叶绿素(Chlorophyll)共存[1]。在对光和组织中的类胡萝卜素进行分析与测定时,通常用有机溶剂将光合组织中的类胡萝卜素与叶绿素同时萃取出。因此,在分析光合组织萃取物( 尤其是绿色蔬菜食品) 中的类胡萝卜素时,将类胡萝卜素和叶绿素进行分离是必需的要求。对于非光合组织的样品,也需要分离胡萝卜素和叶黄素。
    达到上述分离目的最有效手段是色谱(Chromatography)。色谱可以被形容为一个物理化学过
程。这个过程可以被描述为被分离的不同组分在两相之间的分离。两相之中的一相在分离过程中处于静止的状态,被称为固定相,另一相则是不断运动的,被称为流动相。当一组混合物中的不同组分分布于流动相中达到平衡后,流经固定相时,混合物中的每一个组分在两相之间达到新的分布平衡,结果导致不同组分在系统中具有不同的迁移率(Mobility),最终使不同组分在流动
相中被分离。组分在固定相中的迁移可以用“容量因子(Capacity factor,见表达式1)”来描述。当混合物被分离时,不同组分在色谱系统中有不同的容量因子。



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