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增加物镜与观察之间的折射率n。是介质对物镜数值孔径影响示意图。当光线沿光轴方向射向观察物时，自物体S处发出的反射光除沿SO方向反射外，尚有（S1 S1′）（S2，S2′）等衍射光。（a）是以空气为介质（又称干系物镜）的情况，只有（S1 S1′）内的衍射光可以通过物镜，（S1 S1′）以外的衍射光如（S2，S2′）均不能通过物镜。（b）是物镜与观察之间以松柏油或其它油为介质（又称油浸物镜）时，由于折射率n增加，使衍射光的角度变狭，致使（S2，S2′）甚至（S3，S′3）内的衍射光均可通过物镜。因而使物镜通过尽可能多的衍射光束，利于鉴别组织细节。

    在相同介质中，波长短的光源将有较大的折射率。同理，也将有较多的衍射光束进入物镜。

    一般高倍显微镜物镜常设计为油镜。油镜是按某一介质特别设计的，因此应按指定介质使用。zui常用的介质是松柏油（n=1.515），其zui大数值孔径N.A=1.40；用a-壹代溴萘为介质，n=1.658，zui高数值孔径可达1.60。