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采用高速逆流色谱法从土贝母中分离制备出贝萼皂苷元
发布时间:2018-09-14]  阅读次数:446次

来源:分析测试百科网

贝萼皂苷元是一种齐墩果酸五环三萜类化合物,土贝母系葫芦科植物土贝母的干燥块茎,始载于清代《本草纲目拾遗》,具有散结、消肿、解毒之功效。皂苷类为土贝母的主要活性成分,含量较大。

有文献研究表明贝萼皂苷元具有中等强度的糖原磷酸化酶抑制活性以及抗肿瘤等作用,可作为糖原磷酸化酶抑制剂。目前贝萼皂苷元的提取分离方法主要采用乙醇回流提取、大孔树脂或硅胶柱层析、酸水解、碱调 PH,溶剂萃取、重结晶等步骤获得贝萼皂苷元,这些方法生产周期长、样品损失较大,所用有机溶剂毒性较大,不适用于大规模生产。

现在提供一种快速、高效分离土贝母中贝萼皂苷元的方法,即采用高速逆流色谱法从土贝母中分离制备贝萼皂苷元的方法。该分离方法分离效率高、分离时间短,能得到高纯度的贝萼皂苷元。

第一步 取干燥土贝母鳞茎,粉碎,用石油醚脱脂后,以乙醇、甲醇、丙酮和水的混合溶剂超声提取2-4次,提取混合溶剂与药材质量比为8-20 : I,提取液浓缩至相对密度I. 11-1. 18,得总皂苷;
第二步 将总皂苷溶于水并以此加入酸液和乙酸乙酯后加热进行酸水解,待水解完成后趁热分取乙酸乙酯层并浓缩,得乙酸乙酯浸膏;

第三步 在分液漏斗中配制两相溶剂系统,即正己烷-乙酸乙酯-甲醇-7K,体积比为(10-12) : (4-6) : (5-10) : (1-5),充分振摇后在室温下静置过夜,分取漏斗中的上相和下相,超声脱气,取步骤b中的乙酸乙酯浸膏用下相溶解,作为样品溶液备用;将溶剂系统的上相注入高速逆流色谱仪分离管中,待上相充满整个管路后,刺五加苷E调整主机转速,泵入下相,待下相从柱出口流出,两相在分离管中达到动态平衡后,由进样阀注入样品溶液,在210nm波长下检测,根据色谱图收集得到单体化合物贝萼皂苷元。

地肤子果实主要含三萜及其苷类、生物碱、黄酮类和脂肪油等成分,三萜皂苷包括齐墩果酸、木鳖子苷Ic (又名地肤子皂苷Ic),木鳖子苷II c等,其中地肤子皂苷Ic为其抗疹痒、抗炎和抗过敏作用的主要有效成分。


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