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细胞固定和染色

除了上述使用多聚甲醛固定细胞的方法外，还有一种普遍使用的方法是:培养细胞在 - 20 °C 预冷的甲醇中孵育 5 min。但这种方法对于固定表达荧光蛋白的细胞及 FRET 实验中并不推荐。这是因为:这种处理方法是沉淀细胞内的蛋白，而不是使蛋白质发生交联。此外，为了尽可能减少抗体的用量，可以把玻璃片放置到一层Parafilm 上，然后再把抗体溶液加到玻璃片上。这是利用 Parafilm 的疏水性，使抗体溶液集中到玻璃片上，这样可充分利用抗体溶液，节约抗体。