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分光光度法测定发酵食品中微量乙醇的含量
发布时间:2018-08-13]  阅读次数:507次

来源:分析测试百科网

微量乙醇是低度果酒,含酒精饮料和调味品等发酵食品中重要的风味物质。目前,对于微量乙醇的测定主要以气相色谱法为主,重铬酸盐氧化分光光度法测定微量乙醇含量,是一种快速准确的测定方法,它具有操作简便,所需分析仪器简单的特点,尤其适用于生产和质检部门的日常分析。

 一、测定原理 

在酸性溶液中,乙醇可被重铬酸氧化生成乙酸,重铬酸钾中的六价铬被还原成三价铬,其反应式为: 3C2H5OH+2K2Cr2O7+8H2SO4=3CH3COOH+2K2SO4+2Cr2(SO4)+11H2O 

反应中生成的三价铬为绿色,它在585nm处有最大吸收峰,且溶液颜色的深浅与乙醇含量成正比,可以在分光光度计上比色,通过与标准系列进行比较进行定量。

 二、仪器与试剂 

1、  UV-1300紫外可见分光光度计(美析仪器)

2、   蒸馏装置 

3、PHS—3C酸度计

4、乙醇标准溶液:准确吸取2.00mlGR级无水乙醇,置于预先装有少量蒸馏水的100ml容量瓶中,混匀,加水定容至刻度,摇匀备用。 

5、重铬酸钾溶液,称取10.00gAR级K2Cr2O7,用少量水溶解,并定容至250ml。

 6、浓硫酸:AR级,含量95~98%。

 7、1%溴百里酚蓝指示剂 

8、  NaoH溶液:C(NaoH)=1.0mol/L   

 三、测定方法 

1、标准曲线的绘制 

取7支25mlA级比色管,各加入2.00ml重铬酸钾溶液和2.50ml浓H2SO4,混匀,并冷却,依次加入0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00和1.25ml乙醇标准溶液,混匀,反应10分钟后加水至刻度,再次混匀,以0号管调零,于585nm波长处分别测定其吸光度,绘制标准曲线。

2、样品的制备 

准确移取100.00ml样品于250ml蒸馏烧瓶中,加入25mH2O,再加数滴溴百里酚蓝指示剂,用NaoH溶液滴定至蓝色(深色样品用酸度计指示中和至中性),加几粒沸石,连接好蒸馏装置进行蒸馏,馏出液用100ml容量瓶收集,接收瓶用冰浴进行冷却,缓慢蒸馏至接近刻度时取下,放入20℃水浴中30分钟,用H2O定容至刻度,摇匀,备用。

 3、样品的测定 

取1.00ml制备好的样品,按标准曲线绘制的方法进行测定,利用回归方程计算出样品中乙醇的含量。



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