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网织红细胞的分析仪计数法与煌焦油蓝手工法对比分析
发布时间:2018-08-12]  阅读次数:737次

来源:分析测试百科网

  网织红细胞是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡阶段细胞,在周围血液中的数值可反映骨髓造血功能,因而对各类贫血的诊断和治疗反应的观察均有其重要意义。[1]目前大多数实验室采用的是煌焦油蓝活体染色法计数网织红细胞,但是在临床应用中有诸多不便,费时而且操作比较烦琐,且受人为因素影响较多,重复性较差。现在COULTER LH750五分类血细胞分析仪计数网织红细胞与传统的煌焦油蓝手工法进行比较,发现仪器法操作方便,而且结果重复性好。 
  1 材料、试剂与方法 
  1.1 标本来源 
  本院随机病人(包括住院和门诊病人) 
  1.2 试剂 
  1.2.1 煌焦油蓝盐水溶液 
   取煌焦油蓝4克,溶于109mmol/l枸橼酸钠20ml中,最后用8.5g/l氯化钠溶液加至1000ml,混匀,过滤后贮存在棕色试剂瓶中备用。 
  1.2.2 全自动血液分析仪试剂 
   全自动血液分析仪试剂为仪器的配套产品,由相应厂家提供。 
  1.3 仪器法 
   用一次性采血器采集患者静脉血2 ml于EDTA-K2抗凝管中,混匀。使用COULTER HMX hematology五分类全自动血液分析仪多次检测同一标本,检测试剂与质控品为仪器配套产品,按照操作规程正确操作。 
  1.4 手工法 
  1.4.1 将煌焦油蓝盐水溶液2滴加入小试管中,取同一分标本末梢血2滴,混匀染色30分钟。 
  1.4.2 取出混合血液推成血片,然后在油镜下计数1 000个红细胞中网织红细胞数。 
  2 结果 
  取网织红细胞标本各10份,每份标本各做10次,结果发现仪器法测定的平均CV为3.37%、而手工法测定的CV为22.31%,结果显示仪器法所做结果的重复性和精确度较好,而手工法变异系数大,重复性和精确度都比较差,受人为影响因素较多。 
  3 讨论 
  网织红细胞是晚幼红细胞到成熟红细胞之间未完全成熟的红细胞,因其胞浆内尚存在多少不等的嗜碱性物质核糖核酸,在活体染色时,被煌焦油蓝染色后,嗜碱物质凝集成颗粒,其颗粒又可连缀成线,而构成网织状而得名[2]。用煌焦油蓝计数网织红细胞时,其重复性较差[3],费时,准确性也容易受到计数细胞少,血涂片的厚薄、细胞是否均匀分布、核糖核酸染色效果好坏及染色温度、染色时间长短等因素[4]的影响。而DIFF仪器法测定网织红细胞时,用血量少,而且计数细胞多,所以结果准确性高,重复性好。仪器法操作简便快速,减少诸多人为误差因素影响,为临床提供更加可靠的结果。 
   虽然手工法测定网织红细胞可以直观细胞形态而且无需昂贵的仪器,但其重复性较差,有其使用的局限性;而仪器法操作方便,结果准确性高,重复性好,避免主观因素的干扰,方法易于标准化,适合临床大批量标本的快速检测。 


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