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LSM光学原理
发布时间:2018-08-11]  阅读次数:762次

来源:分析测试百科网


      LSCM 主要基于共轭焦点技术设计而成,即以激光作为光源,采集时使激光光源、被测样品和探测器处于彼此的共轭位置上。基本工作过程为:光源发射出的激光束经挡板上的照明针孔后形成一个点光源,其射出飞光线经双色反射镜发射后,通过显微物镜聚焦到样品上的一点,该点由光源照射激发出荧光,透过显微物镜和双色发射镜聚焦到探测针孔形成共焦点,可由光电倍增管探测收集,被探测点所在的平面即为共交平面,经过计算机处理、成像和存储过程,便得到了交面上一点的成像。同时,激光光束对样品进行切面扫描,便可实现该平面的光学断层成像,载物台沿 Z 轴方向缓慢移动,可以使不同深度的样品层进入焦平面,又可得到不同深度样品层的成像。成像过程中,只有样品焦平面上的点所激发的荧光可以在检测针孔正确聚焦,从而备光电探测器接收,焦平面以外的光线到达检测针孔时处于离焦状态,因此被直接滤除,可见共焦探测针孔就像一个滤波器,非共焦面的背景均呈黑色,增强了反差,极大地提高了激光扫描共聚焦显微成像系统的清晰度。




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