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微分干涉衬度DIC

DIC利用的是偏振光原理，如图1-6，透射式DIC显微镜主要有四个特殊的光学组件：起偏振镜、DIC棱镜Ⅰ、DIC棱镜Ⅱ和检偏振镜。起偏振镜直接装在聚光系统的前面，使光线发生线性偏振。在聚光器中安装DIC棱镜，此棱镜可将一束光分解成偏振方向不同的两束光（x和y），二者成一小夹角。聚光器将两束光调整成与显微镜光轴平行的方向。最初两束光相位一致，在穿过标本相邻的区域后，由于标本的厚度和折射率不同，引起两束光发生了光程差。在物镜的后焦面处安装了DIC棱镜Ⅱ，它把两束光波合并成一束。这时两束光的偏振面（x和y）仍然存在。最后光束穿过第二个偏振装置，即检偏振镜。在光束形成目镜DIC影像之前，检偏振镜与偏光器的方向成直角。检偏振镜将两束垂直的光波组合成具有相同偏振面的两束光，从而使二者发生干涉。x和y波的光程差决定着透光的多少。光程差值为0时，没有光穿过检偏振镜；光程差值等于波长一半时，穿过的光达到最大值。于是在灰色的背景上，标本结构呈现出亮暗差。为了使影像的反差达到最佳状态，可通过调节DIC棱镜Ⅱ的纵行微调来改变光程差，光程差可改变影像的亮度。调节DIC棱镜Ⅱ可使标本的细微结构呈现出正或负的投影形象，通常是一侧亮，而另一侧暗，这便造成了标本的人为三维立体感。