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法国sebia hydrasys全自动免疫电泳仪特点
发布时间:2018-07-21]  阅读次数:5513次

来源:分析测试百科网

  先进的电泳仪和电泳技术不断发展,现已推出半干式无需缓冲液的水平电泳系统,是电泳历史上又一新的里程碑,现已法国sebia hydrasys全自动免疫电泳仪为例作简要介绍。

一、基本结构

1、稳压电泳仪具有多种功能可进行含水琼脂糖凝胶的各种电泳,蛋白质电泳过程中可分段聚焦,分辨力强,具有对电泳过程中不同阶段进行处理如:点样、迁移、温育、染色、脱色和烘干各种功能;可数个免疫电泳同时进行;可自动调节电压、电流强度、电功率,附有一小型强度交换器系统以调节温度;显示屏上具有数十种试验项目供使用者选择和人机对话,染色部分可管理数种不同的染色反应,每一试验项目均由报警系统自动控制。

2、段层扫描仪是近几年来发展起来的一种高技术,有很强的光学和电子系统以精确测量吸光度(a),可对由多条斑点提供的微量聚集信息获得简捷快速的图形。其特点如下。

3、分辨率高,可达150μm。

4、线性由6个a值组成,不同检测项目有各自数量单位。

5、附有鼠标、键盘和彩色屏幕进行人机对话。

6、有数十项测试程序。

二、基本原理

全自动分析仪根据检测项目选择程序后,电泳分离由仪器自动进行,然后加入抗血清进行免疫固定,染色和脱色部分也完全由仪器进行操作。免疫固定技术是将同一份样品点样在琼脂板上的6个不同位置。通过电泳,根据血清蛋白质的电荷不同将其分开。然后将igg、iga、igm、κ、λ的抗血清分别加入到5条电泳区带中;蛋白质固定溶液则加到第一参考蛋白电泳模式中。经温育后,若有对应的抗原存在,则适当位置有抗原抗体复合物形成并沉淀下来。固定???,电泳胶在洗脱液(nac1溶液)中漂洗,以去除未结合蛋白质,只保留抗原抗体复合物。经染色后蛋白质电泳参考模式和抗原抗体沉淀区带被氨基黑着色。现最常用于m蛋白的鉴定。

三、性能特点

ife结合了蛋白质电泳的高分辨率和抗原抗体反应的特异性,为基因、蛋白质研究提供了强有力的分析工具。在许多实验室ife已经取代了传统的免疫电泳技术,成为单克隆抗体定性和分型的首选方法。

ife的特点可以归纳为以下几条。

1、周期短时间短是ife最大优势,ife的整个操作过程仅需1.5~2h,而iep则需要温育过液。

2、敏感性强ife是一个非常敏感的系统,它能检测到0.5~1.5g/l含量的单克隆抗体,而iep只能检测到10g/l。这使得一个常规的电泳技术被改进后,实验室能够检测出非常少的单克隆片段

3、分辨率高ife能够利用非常短的电泳移动距离分离出单克隆组分,这个特性在iga、轻链多态性分析以及一些单克隆组分降解的区别上是非常有用的。

4、结果易于分析由于ife可以通过抗原抗体沉淀模式直接对照常规蛋白质电泳模式而不依赖沉淀弧形状的偏离来分析,所以ife的结果比iep更易于分析。



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