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锌 ----双硫腙比色法(一次提取)

样品经消化后,在pH4.0～5.5时,锌离子与双硫腙形成紫红色络合物,溶于四氯化碳，加入硫代硫酸钠，防止铜、汞、铅、铋、银和镉等离子干扰，与标准系列比较定量。

试剂：

1.乙酸钠溶液(2 mol/I):称取68 g乙酸钠(CH,COONa·3H,O)，加水溶解后稀释至250 mL,

2.乙酸(2mol/L):量取10.0 mL冰乙酸，加水稀释至85mL,

3.乙酸一乙酸盐缓冲液:乙酸钠溶液(2 mol/L)与乙酸(2 mol/L)等量混合，此溶液pH为4. 7左右。用二硫腺一四氯化碳溶液(0. 1 g/L)提取数次，每次10 mL,除去其中的锌，至四氯化碳层绿色不变为止，弃去四氯化碳层，再用四氯化碳提取乙酸一乙酸盐缓冲液中过剩的二硫踪，至四氯化碳无色，弃去四氯化碳层。

4.硫代硫酸钠溶液(250 g/L):乙酸钠溶液(2 mol/L)与乙酸(2 mol/L)等量混合，此溶液pH为4. 7左右。用二硫腺一四氯化碳溶液(0. 1 g/L)提取数次，每次10 mL,除去其中的锌，至四氯化碳层绿色不变为止，弃去四氯化碳层，再用四氯化碳提取乙酸一乙酸盐缓冲液中过剩的二硫踪，至四氯化碳无色，弃去四氯化碳层。

5. 1:1氨水

6.甲基橙指示液(2 g/L):称取0.2 g甲基橙，用乙醇(20%)溶解并稀释至100 Ml

7.盐酸(2 mol/L):量取10 mL盐酸，加水稀释至60 mL,

8.锌标准使用液（1.0ug）:

10. 二硫踪一四氯化碳溶液(0.01g/L)。

吸取5.0～10.0mL定容的消化液和相同量的试剂空白液, 分别置于25mL比色管中；

吸取0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL锌标准使用液(相当0、1、2、3、4、5μg锌),分别置于25mL比色管中。

于样品消化液、试剂空白液及锌标准液中各加1滴甲基橙指示液，用氨水调至由红变蓝，再各加5mL乙酸-乙酸盐缓冲液及1mL硫代硫酸钠溶液混匀后, 各加10.0mL0双硫腙-四氯化碳溶液，定容至25ml.剧烈振摇4min，静置分层，经脱脂棉将四氯化碳层滤入25px比色杯中,以四氯化碳调节零点,于可见分光光度计波长530nm处测吸光度,绘制标准曲线比较。