来源：分析测试百科网

做液相色谱的同学基本都会碰到分叉峰

很多时候

这都意味着硬件或者方法某些地方可能出现问题

今天我们就一起看看导致峰分叉的原因

以及如何解决这个问题

首先，我们需要判断

这到底是一个峰，还是两个峰?

A图主峰前面有一个肩峰

这到底是峰形不好

还是另外一个化合物没分开呢?

降低该成分在样品中的浓度
B图是降低该成分浓度后

进样后得到的色谱图

如果这是一个峰

那肩峰也应该响应变小

但是这个例子里

肩峰没有变小

这应该是另外一个化合物

这时候，我们就要考虑如何改变方法

将这两个东西分开

如果所有峰的峰形都不好
一般来说

一个样品都会出多个峰

峰形不好，绝大多数时候

在每个峰上面都会出现

比如像下面这样:

A图是所有峰都拖尾.
B图是所有峰都有肩峰，

也可以说峰分叉
这种情况一般都是色谱柱头塌陷

或者柱头的筛板被堵导致的

请看下面的图

A图是正常的柱头

B图是筛板被堵的柱头
正常情况下

所有样品分子都是均匀通过色谱柱

形成一个对称的峰形
堵塞的情况下

有一部分样品分子进入色谱柱就会受到阻扰

导致时间拖后，形成拖尾
对于色谱柱塌陷的情况

用同样的方法大家也不难理解

只不过这时候

是一些样品分子可能跑的比正常的快了一些

柱出口放空，

冲20-30ml流动相。

虽然柱子上都有表明使用方向，

但是对于硅胶基质的色谱柱

基本都可以反冲。
将柱头污染物

如泵密封圈的碎屑，

样品中的污染等冲走，

就能解决问题。

当然，还是要提倡大家注意

样品上机之前的前处理

和及时更换磨损的泵密封圈。

有条件的还是用保护柱，

大不了就换保护柱，

也比换色谱柱强。

现在估计做这个事情的人不多，

但是谁有废柱子，

想练练也未尝不可。

根据之前说的，

可能是柱头堵了，

或者塌陷了。

但是进一步检查，

发现另有原因。

方法用的150 mm 4.6 mm, 5 um C18 柱子，

78% 乙腈，1.5ml/min，等度方法，

进样10ul，100%乙腈溶解的样品。
一般来说，

虽然10ul的纯乙腈不会引起峰形不好，

但是有时候样品溶剂的极性跟流动相差异较大时，

的确会引起峰形的问题。

我们怎么办呢？

降低溶剂乙腈的比例，

降到50%看看。

从下图B，4min的峰可以看出，

没啥改观。

结果如图C，

基本没变化。

算了，明天再说吧。

还能干嘛呢?

更换筛板?

算了，直接换柱子吧！

结果如D，

噢，好很多噢。

之前柱子肯定有问题，扔了。

但是峰还是有点宽，

估计还是哪儿有问题。

手上忙，没时间管这个。

重新配了流动相，

一跑，好了，如图E。

虽然到底什么原因导致之前峰形的问题，

已经无从查找

（柱子扔了，旧流动相也没了），

但是也给我们提供了一个解决问题的步骤：

希望以上信息能够让各位同学

在碰到峰形不好的问题时，

有一些思路，

不至于手足无措。

也欢迎大家在讨论群里讨论和补充

上面没有提到的可能影响峰形的可能。

祝大家在群里聊的愉快！