来源：分析测试百科网

1.开始进样前30分钟开氘灯即可，节约灯的能量和使用时间。

　　2.流动相的使用和注意事项：

　　①所用流动相必须预先滤过和脱气，流动相一般贮存于玻璃不锈钢容器内。贮存容器一定要盖严，防止溶剂挥发引起组成变化。磷酸盐、乙酸盐缓冲液很易长霉，应尽量新鲜配制使用，不要长期贮存。容器应定期清洗，特别是盛水、缓冲液和混合溶液的瓶子，以除去底部的杂质沉淀和可能生长的微生物。

　　②配制流动相用水需为娃哈哈牌纯净水或经超声过滤后的纯化水，流动相配制好后先用直径为5cm，孔径为0.45ｕm的滤膜，通过沙芯过滤器的过滤，然后在超声仪上超声。

　　③不得将装流动相的容器直接放置与超声仪内，需放与筛网上进行超声。

　　3.六通阀的使用和维护注意事项：

　　①样品溶液进样前必须用滤膜过滤，以减少微粒对进样阀的磨损。

　　②转动阀芯时不能太慢，更不能停留在中间位置，否则流动相受阻，使泵内压力剧增，甚至超过泵的最大压力；再转到进样位时，过高的压力将使柱头损坏。

　　③为防止缓冲盐和样品残留在进样阀中，每次分析结束后应冲洗进样阀。通常可用水冲洗，或先用能溶解样品的溶剂冲洗，再用水冲洗。

　　4.色谱柱柱压升高的主要因素：

　　①泵的单向阀堵塞。

　　②色谱柱的入口筛板堵塞。

　　③吸滤头堵塞。

　　④PEEK管接口处堵塞。

　　5.色谱柱柱压不稳的因素：

　　①泵内有空气。

　　②泵密封垫损坏。

　　③溶剂中的气泡。

　　④系统检漏，找出漏点。

　　6.样品峰保留时间漂移的主要因素：

　　①室内温度变化过大。

　　②流动相成分发生变化。

　　③色谱柱未平衡好。

　　④泵中有气泡。

　　⑤该流动相是否适宜此样品的检测。

　　7.基线漂移的主要因素：

　　①柱温波动。

　　②流动相不均匀。

　　③流通池被污染或有气体。

　　④检测器出口阻塞。

　　⑤流动相配比不当或流速变化。

　　⑥流动相污染、变质。

　　⑦使用循环溶剂。

　　8.检测器灵敏度不够的主要因素：

　　①样品进样量不足。

　　②波长设置不正确。

　　③检测器池窗污染。

　　④检测池中有气泡。

　　⑤电压不稳。

　　⑥流动相流速不合适。

　　9.色谱柱的使用和维护注意事项：

　　①避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料，因此在调节流速时应该缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓。

　　②应逐渐改变溶剂的组成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂改变为全部是水，反之亦然。

　　③一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。

　　④选择使用适宜的流动相（尤其是pH），以避免固定相被破坏。

　　⑤避免将复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。

　　⑥经常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。

　　⑦保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防止溶剂挥发干燥。绝对禁止将缓冲溶液留在柱内静置至次日或更长时间。

　　⑧色谱柱使用过程中，如果压力升高，一种可能是滤片被堵塞，这时应更换滤片或将其取出进行清洗；另一种可能是大分子进入柱内，使柱头被污染；如果柱效降低或色谱峰变形，则可能柱头出现塌陷，死体积增大。

　　⑨以硅胶为基质的填料，只能在pH2~9范围内使用。每次分析检测完成后，最好用洗脱能力强的洗脱液冲洗，例如ODS柱宜用甲醇冲洗至基线平衡。

　　10.样品必须用直径为2.5cm，孔径为0.45ｕm的滤膜针式过滤。如有明确要求需用离心过滤的，经离心过滤后取上清液即可。