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食品中淀粉的测定:酶水解法
发布时间:2018-04-13]  阅读次数:781次

来源:分析测试百科网

  一、目的与要求:

  1、明确与掌握各类食品中淀粉含量的原理及测定方法。

  2、掌握用酶水解法和酸水解法测定淀粉的方法。

  二、原理

  样品经除去脂肪及可溶性糖类后,其中淀粉用淀粉酶水解成双糖,再用盐酸将双糖水解成单糖,最后按还原糖测定,并折算成淀粉。

   三,试剂:

   1、0.5%淀粉酶溶液:称取淀粉酶0.5克,加100毫升水溶解,数滴甲苯或三氯甲烷,防止长霉,贮于冰箱中。

   2、碘溶液:称取3.6克碘化钾溶于20毫升水中,加入1.3克碘,溶解后加水稀释至100毫升。

  3、乙醚

  4、85%乙醇

  5、6N盐酸:量取50毫升盐酸加水稀释至100毫升。

  6、甲基红指示液:0.1%乙醇溶液。

  7、20%氢氧化钠溶液。

  8、碱性酒石酸铜甲液:称取34.639克硫酸铜(CuS04·5H2O)。加适量水溶解,加0.5毫升硫酸,再加水稀释至500毫升,用精制石棉过滤。

   9、碱性酒石酸铜乙液:称取173克酒石酸钾钠与50克氢氧化钠,加适量水溶解,并稀释至500毫升,用精制石棉过滤,贮存于橡胶塞玻璃瓶内。

   10、0.1000N高锰酸钾标准溶液。

   11、硫酸铁溶液:称取50克硫酸铁,加入200毫升水溶解后,人100毫升硫酸,冷后加水稀释至1000毫升。

   四、操作方法:

   1、样品处理:

   称取2-5克样品,置于放有折叠滤纸的漏斗内,先用50毫升乙醚分5次洗除脂肪,再用约100毫升85%乙醇洗去可溶性糖类,将残留物移入250毫升烧杯内,并用50毫升水洗滤纸及漏斗,洗液并入烧杯内,将烧杯置沸水浴上加热15分钟,使淀粉糊化,放冷至60℃以下,加20毫升淀粉酶溶液,在55-60℃保温1小时,并时时搅拌。然后取1滴此液加1滴溶液,应不显现蓝色,若显蓝色,再加热糊化并加20毫升淀粉酶溶液,继续保温,直至加碘不显蓝色为止。加热至沸,冷后移入250毫升容量瓶中,并加水至刻度,混匀,过滤,弃去初滤液。取50毫升滤液,置于250毫升锥形瓶中,并加水至刻度,沸水浴中回流1小时,冷后加2滴甲基红指示液,用20%氢氧化钠溶液中和至中性,溶液转入100毫升容量瓶中,洗涤锥形瓶,洗液并人100毫升容量瓶中,加水至刻度,混匀备用。

   B、测定:

   吸取50毫升处理后的样品溶液,于400毫升烧杯内,加入25毫升碱性酒石酸铜甲液及25毫升乙液,于烧杯上盖一表面皿,加热,控制,在4分钟内沸腾,再准确煮沸2分钟,趁热用铺好石棉的古氏坩埚或c4垂融坩埚抽滤,并用60℃热水洗涤烧杯及沉淀,至洗液不呈碱性为止。将古氏坩埚或垂融坩埚放回原400毫升烧杯中,加25毫升硫酸铁溶液及25毫升水,用玻棒搅拌使氧化亚铜完全溶解,以0.1000N高锰酸钾标准溶液滴定至微红色为终点。

   同时量取50毫升水及与样品处理时相同量的淀粉酶溶液,按同一方法

  做试剂空白实验。

  计算:X1=((A1-A2)×0.9)/( m1×50/250×V1/100×1000)×100

  X1:样品中淀粉的含量,%;

  A1:测定用样品中还原糖的含量,mg;

  A2:试剂空白中还原糖的含量,mg;

  0.9:还原糖(以葡萄糖计)换算成淀粉的换算系数;

  m1:称取样品质量,g;

  V1:测定用样品处理液的体积,毫升(m1)。


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