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获得基因敲入的食蟹猴。中科院神经所供图

　　中科院神经科学研究所、脑科学与智能技术卓越创新中心、神经科学国家重点实验室杨辉研究组与苏州非人灵长类研究平台孙强团队合作，利用了一种以同源臂介导的末端接合（HMEJ）为基础的基因敲入策略，在世界上首次获得了基因敲入的食蟹猴。近日，该成果在线发表于《细胞研究》。

　　基因修饰猴模型可以用于模拟人类疾病症状，因此可以作为研究人类疾病机制和推进临床治疗的工具。然而，由于种种原因例如效率低，此前还没有基因成功敲入猴的报道。

　　基于实验室之前的研究，同源臂介导的末端接合（HMEJ）的方法可以有效地在猕猴胚胎上实现高效的靶向基因整合。研究人员进一步优化受精卵注入条件，包括供体质粒浓度以及注射剂量，期望在提高敲入效率的同时保持正常的胚胎发育，进而获得基因敲入的猴子。

　　具体来说，研究人员在Actb位点插入p2A-mCherry以实现mCherry在Actb启动子的控制下表达。在经历完整的怀孕周期后，研究人员成功地获得了一对双胞胎猴和三只单胎的雌性猴。通过直接表皮荧光观察两只新生猴的脚趾发现，与野生型相比，它们展现出mCherry荧光。对两只死亡雌猴的各个组织进行切片观察，发现尾巴、脚趾、心脏、肌肉、心脏、肾、大脑和卵巢均显示出不同嵌合程度的mCherry表达。值得注意的是，研究人员在卵巢的大部分区域都检测到mCherry的表达，说明基因敲入猴子具有生殖系传递的可能性。

　　专家表示，基于其强大的DNA敲入效率和高保真性，HMEJ介导的敲入策略为构建靶向基因修饰的猴模型提供了可能性。