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只养雌鳗鱼又不遗留激素?质谱分析专家出了一招
发布时间:2017-05-02]  阅读次数:982次

来源:分析测试百科网

  分析测试百科网讯 当我们从超市里买来一尾又肥又大的鳗鱼时,不会想象到,年轻时,它其实游动在入海口,并且连性别都没有确定。现代科学技术确保它在上餐桌前经历了一系列复杂的过程。

  商业养殖鳗鱼,首先要从入海口的处捞出性别还没有确定的“年轻的馒鱼”(young eels),又叫“玻璃鳗鱼”(glass eels)或鳗线,然后在人工养殖池中养大。因为人工养殖环境中,鳗鱼的密度过大,使得这些玻璃鳗鱼中的大部分会发展成为雄性。

  但是,雌性鳗鱼的个头能长得更大,更具商业价值。于是,养殖者会加入含有雌激素,如17β-雌二醇的饲料,以确保其雌性化。但是,我们还要注意,这些加入的雌激素只需要保证馒鱼成为雌性,而不是遗留下来,被和鳗鱼一起送上餐桌。所以养殖鳗鱼中的雌激素水平必须准确监测,以确保当鳗鱼类进入人类食物链时,没有多余的激素存在。

  类固醇激素一般通过免疫测定,LC-MS或GC-MS检测(后一种检测方法通常需要衍生化)。加拿大科学家决定把LC-MS / MS与差示离子迁移谱(DMS)结合起来使用。后一种技术发生在HPLC和MS系统之间。这种技术使用ESI源产生离子,然后根据离子在电场中不同的迁移率将它们分离。

  鳗鱼

  LC-MS / MS与DMS组合用于类固醇激素检测

  研究人员检测了美国鳗鱼样品中的三种类固醇激素:添加到饲料中的17β-雌二醇,以及相关化合物雌酮和雌三醇。这三种化合物在一定程度上天然存在于鱼类中。在不同时间点采集鱼进行肌肉组织取样,并捕获野生雌性鳗鱼进行抽样。将肌肉样品匀浆,然后用乙腈在超声处理下萃取。

  使用装有Phenomenex Luna3μmC18柱的ThermoScientific UltiMate 3000 RSLCnano色谱仪和含有0.05%氢氧化铵的乙腈和水梯度洗脱进行HPLC分析。将SciEx SelexION源用于差示离子迁移率(DMS),以异丙醇作为改性剂(即为了提高选择性而引入到离子迁移源中的挥发性物质)。在这种情况下,为了通过DMS分离类固醇离子,需要使用改性剂和仔细调整DMS参数。最后,使用Sciex QTrap 5500三重四极杆线性离子阱质谱仪进行MS / MS。优化选择性反应监测以给出感兴趣的三种类固醇的特异性转换。

   总的来说,LC-MS / MS与DMS组合可得到很好的分离效果,但应注意的是,三种主要的化合物可以在最佳条件下通过HPLC单独分离。打开DMS有助于提供更清晰的光谱。该系统用于测量在补充剂从其饮食中撤出后鳗肌中17β-雌二醇的下降。发现有关类固醇在撤离后第5天达到了背景水平,与未经处理的养殖鳗鱼相同。最终水平比野生雌鱼发现的水平要低一些。在最后一次喂食17β-雌二醇之后,仅观察到雌激素达到较低水平,而没有检测到雌三醇。

  DMS增强了LC-MS / MS,但值得吗?

  LC-MS / MS与DMS的组合可成功应用于鳗鱼激素的监测。结果清楚地表明,加入17β-雌二醇的雌性化鳗鱼没有产生任何长期积累的雌激素。然而,尽管DMS有助于提供更清晰的光谱,但仍未实现适当的分离。目前尚不清楚是否有实验室会考虑将DMS系统的额外费用用于类固醇分析,尽管这无疑可显著提高一些复杂的分析性能。



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