来源：分析测试百科网

　　怎样提高点样效率?

　　点样是造成TLC定量误差的主要来源。定量毛细管更适合较小体积的点样；微量注射器更适合较大体积的点样。这主要是因为微量注射器受小气泡、溶液回爬现象的影响较大。为避免不同定量毛细管理体制的占样误差，建议一块薄层板上最好用同一只定量毛细管。但应注意更换样品时，应将毛细管用超声波或不同极性溶课剂清洗干净。在制备样品时，溶样溶剂黏度不能过高，以便于点样；溶剂沸点过低则进样体积易变，过高则会改变展开剂组成；对样品溶解度过高会使样点发生空心现象，常用的溶剂为甲醇、乙醇、丙酮。经典TLC样点原点一般为直径3mm点间距离1-2cm底边距离1.5cm；HPLC样点原点一般为直径1mm点间距5mm底边距1cm.

　　展开剂的选择

　　TLC与HPLC相比，一个突出的优点就是流动相的选择具有更大的灵活性，流动相的选择的目的是使绝大部分样品的Rf值位于0.1-0.7之间并达到较好的分离，与此对应的是流动相要有适当的强度和组成。流动相强度越大，溶质Rf值越大，但很可能降低分离能力；另外单一溶剂很难分离较复杂的混合物、根据相似相溶原理，要使用多元溶剂体系。一般展开剂体系选择如下：根据分离样品性质、薄层色谱板性质选择一个二元溶剂体系，通过调节溶剂比例以寻求适合Rf值，适合的Rf值找到后，再寻求极性参数相同的二元溶剂体系两个，以这三个组成为三点组成一个三角形，则可看到：三角形顶点是二元体系，边是三元体系，三角形内是四元体系，并且极性一致，可根据几何原理得出任一点组成，这种方法较为直观，也较简单。

　　理想的显色希望灵敏度高，斑点颜色稳定、斑点与背景间的对比度好，斑点的大小及颜色的深度与物质的量成正比，在样品组成并不完全已知的情况下，通用显色方法显得尤为重要。

　　通用显色方法主要有：

　　1、紫外照射法：方便、不破坏样品；

　　2、碘蒸气法：通用性强，与紫外法结合灵敏度高于该两法单独使用；

　　3、荧光试剂：制造荧光背景，使原来紫外下无荧光物质被鉴别，有荧光物质更明显；

　　展开剂选择的大概原则

　　选择展开剂一般要用混合溶剂：一般要有一种对所要展开样品溶解度较大的溶剂，视样品的极性，再选用相应的体系

　　极性小的用乙酸乙酯：石油醚系统

　　极性较大的用甲醇：氯仿系统

　　极性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系统

　　拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸需要在展开剂中加醋酸酸(反应体系有酸)或者加三乙胺(反应体系有碱)

　　关于展开剂：

　　分离的样品酸性比较大，一般在展开剂中加酸加甲酸是因为该样品是酸性的，加酸的量和该物质的酸性成正比关系，加水可能是因为你的样品是苷类的用酸水做一下缓冲，目的就是让斑点圆滑，不脱尾，展距良好。

　　饱和也非常重要，边缘效应很严重的不妨用下端浸在展开剂中的滤纸贴在展开缸的内壁，这样饱和效果会好一些

　　1)在层析缸口涂适量凡士林，增加密封性；；

　　2)以展开剂边缘效应的大小，确定展开剂平衡时间的长短，一般平衡时间在30分钟即可。

　　有机溶剂的极性，甲醇>氯仿，因此在氯仿：甲醇：氨水(10:1:0.6)这个展开剂中，如果极性略大，可适当降低甲醇比例；如极性太小，可适当增大甲醇比例。

　　氯仿：甲醇：氨水 10:1:0.6 和20：2：1.2

　　极性肯定是相同的，这有问题吗?另外还有一个问题，这个展开剂中，甲醇用量较小，而甲醇又易挥发，容易产生边缘效应，要特别注意展开剂的平衡和层析缸的密封。

　　不同的展开系统意思是其中至少应该有一种溶剂不同(最好是不同分类组的溶剂)，而不是比例不同。或者使用不同的固定相。

　　关于裂板：

　　板子会裂口，一则可能是因为硅胶的比例太大，二则可能是，板子要在常温下晾干后，再在烘箱中活化。如果铺完不久就在较高温度下，裂口的几率就比较高的。