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研究人员开发出基于Simoa检测登革热宿主免疫反应的实验
发布时间:2015-02-25]  阅读次数:448次

来源:分析测试百科网

  在这项研究中,其结果本周已经在线发表在《Journal of Clinical Microbiology》上,Tufts小组描述了基于Simoa发展的实验,其能够检测2型抗登革热IgG和IgM,并且比较了其与另外两种抗体的市售ELISA试剂盒的灵敏度。

  该比较表明,Simoa方法比一种试剂盒灵敏度高1000被,其另一种高10000倍。

  根据该组的说明,目前使用的ELISA抗登革热抗体检测,在遭受疾病的最初几天缺乏敏感性,当该病体内针对疾病的抗体浓度太低的时候,其就不能被准确的检测到。

  RT-PCR检测对于早期登革热诊断是有用的,但是血清方法花费更低,因此其更具有吸引力,尤其是在登革热流行的国家中。

  Tufts团队于是决定开发并且检测基于Simoa的检测方法,并且希望数字平台或许能够更加灵敏的检测出抗登革热抗体,这有助于打开在感染后早期检测到该疾病的可能性。

  作者写道,他们团队使用基于失活的登革热2型病毒抗原包被的磁珠特异性捕获抗体的间接Simoa方法。

  加入生物素化的检测与人类IgG或者IgM特异性的抗体,将会使每个捕获抗体都能被检测到,之后将各个磁珠分离开来,密封在存在荧光底物的反应孔中。

  检测反应孔中荧光产物的浓度,能够检测到单一的抗体分子。通过比较活性孔和失活孔的数量,可以推断出原是样品中IgG或IgM分子的浓度。

  在他们的研究中,Tufts团队首先检测了Simoa实验的灵敏度,这是通过使用连续稀释的登革热2型阳性血浆进行的,其结果与另外两种基于ELISA的登革热检测试剂盒进行了比较。

  根据作者的说法,IgG ELISA能够检测稀释到1:10000的血浆。与此相反,IgG Simoa能够在1:10000000稀释的条件下检测到抗登革热的IgG,因此其比the EuroImmun的IgG ELISA试剂盒灵敏度高1000倍。

  同样的,IgM Simoa能够检测到抗登革热的IgM的稀释度,比EuroImmun IgM ELISA试剂盒高10000倍。

  作者写道,总的来说,结果表明,相比较于ELISA,Simoa能够在登革热感染的更早期检测到感染。

  使用另外的临床验证,该方法能够提供一种区别初级和次级感染的方法,并且确定哪些患者具有发展成登革热出血热或者休克综合症的风险。


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